Gram boyama yapmak için hazırlanmış preparatın üzerine kristal viyole boyası damlatılıp 1 dakika beklenir ve iyot-lugol çözeltisi ile yıkanarak kristal viyole uzaklaştırılır. Preparata tekrar iyot-lugol çözeltisi damlatılarak 1 - 2 dakika bekletilip, distile su ile yıkanarak iyot-lugol çözeltisi uzaklaştırılır. Preparatın üzerine %96 'lık etil alkol veya eter – aseton çözeltisi damlatılarak 10 - 15 saniye beklenir, distile su ile yıkanır ve karşıt boya olarak safranin damlatılır ve 20 - 30 saniye bekletilir. Preparat distile su ile yıkanarak havada kendi halinde kurumaya bırakılır.
Hans Christian Joachim gram adlı bilim adamının bulduğu boyama * yöntemi. Gram + hücreler alkolle boyanırken, gram - hücreler boyanmaz. Bu tamamen bakterilerin hücre duvarlarında bulunan yapılarla ilgilidir.
mikrobiyolojide, bakterileri sınıflandırmada kullanılan boyama yönteminin adı. gram boyasıyla boyanan bakterilere gram pozitif denir ve mor boyanır, boyanmayanlara gram negatif denir ve renkleri pembe kalır. bakterilerin sınıflamasında ilk adımdır.
